第二個影響洗滌效果的主要參數是洗滌循環的量。當然，洗滌次數越多，ELISA檢測試劑盒背景越低。然而，太多次的洗滌會降低信號強度，使其難以測定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復洗滌三次。
不過，ELISA試劑盒板的制造商會對洗滌次數提出建議。ELISA試劑盒一般而言，制造商包被平板需要的洗滌次數比用戶包被的平板要少。對于用戶包被的Elisa板，必須優化洗滌次數。ELISA檢測試劑盒洗滌步驟可降低未結合抗體所引起的背景信號，從而增加分析的信噪比。每一步之間的洗滌確保只有特異事件被保留，在zui后一步產生信號。而不充分的洗滌會導致差異和高背景，從而帶來不理想的結果。本文將為你介紹一些利用自動洗板機來洗滌ELISA檢測試劑盒平板的技巧。
控制洗滌量和洗滌次數的另一種方法是加入過量的洗滌液。一般來說，96孔板的每個孔能容納330至460μl。不過，有些自動化洗板機可設置程序，分配遠遠超出這個量的洗滌液，比如1ml。它是如何做到的呢？其實很簡單，就是在分液的同時打開吸液功能。換句話說，隨著分液器分配更多的液體，抽吸器也將液體吸出。ELISA檢測試劑盒這種技術能增加洗滌量，但不會溢出到其他孔中。
